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修饰位点鉴定
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> 技术简介
由于蛋白质发生修饰后其分子质量会发生相应的改变，同时质谱能够精确测定蛋白质或多肽分子质量，根据这一特性，开始将质谱应用于蛋白质翻译后修饰的鉴定。但由于翻译后修饰的蛋白质在样本中含量低且动态范围广，检测前首先需要对修饰蛋白质或肽段进行富集，再进行质谱鉴定。
> 技术原理
蛋白样品中，发生磷酸化的蛋白和肽段含量极低，且存在各种非磷酸化肽段和无机盐的干扰，需要对磷酸化蛋白或肽段进行富集才能进行有效的质谱检测。金属氧化物TiO2亲和纯化是一种常用的磷酸化肽段富集方法。在酸性条件下，TiO2表面带正电，可以与磷酸化肽段发生静电作用而达到吸附的目的。样本经酶切后，用TiO2微球对磷酸化肽段进行富集，富集后的产物由高精度质谱分析，并通过专业软件Maxquant完成数据检索。
> 技术优势
高效性：TiO2富集效率高达95%，可提高修饰肽段检测效率
高精确度：基于高精度的Obitrap质谱分析，对修饰位点精确鉴定
> 应用领域
疾病机理研究、植物抗逆研究、作物机制研究、位点修饰验证
> 技术路线
> 实验仪器
Q Exactive HF-X（Thermo Fisher）
Orbitrap Fusion™ Lumos™ Tribrid™（Thermo Fisher）
Orbitrap Exploris™ 480（Thermo Fisher）
Orbitrap Exploris™ 240（Thermo Fisher）
Orbitrap Fusion™ Tribrid™（Thermo Fisher）
> 数据分析
数据质控结果
磷酸化位点鉴定结果
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